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学术动态
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记者探秘H7N9检测全过程:采样咽部上皮细胞
作者:    人气:3678    时间:2013-6-19 10:24:47

 


  415日,记者从辽宁省卫生厅了解到,全省64家哨点医院已经进入了战备阶段,全面监控发烧发热患者。

  对于H7N9病毒,实验室检测是确诊关键一步。

  H7N9在实验室如何确定?会不会被快速筛出?

  当日,记者来到辽宁省疾控中心流感实验室,探秘H7N9的检测手段。

  第一步

  提取样本

  “可疑病例出现后,会由哨点医院在第一时间报告给当地疾控部门。”省疾控中心副主任姚文清表示。具体说来,哨点医院将提取患者的鼻咽拭子或是呼吸道的样本,送往全省的15家网络实验室。目前,这些实验室均已备有试剂,并具备了确诊能力,而从提取样本到送往实验室大约需要1个小时。

  在省疾控中心的流感实验室内,姚文清打开了一个大冰箱。“这台冰箱专门存放检测试剂,外表看起来普普通通,实际上发现什么传染病,都要靠这个冰箱的试剂来确定,包括排除季节性流感、甲流、H5N1以及现在的H7N9。”

  对付H7N9病毒需要大量的筛查,试剂会不会不够用?姚文清介绍,目前,疾控部门已经掌握了测试剂的序列,一旦试剂不够,厂家会马上进行再生产。

  第二步

  采样咽部上皮细胞

  标本送到实验室后,实验室的工作人员将全副武装进行接收,戴N95口罩、穿连体蓝色防护服、鞋套。而在病毒培养的时候,将会启动最高等级防护。

  为了防止标本被外界环境污染,同时也是为了保护实验人员的安全,标本首先要在生物安全柜内进行采样。在此,粘有咽部上皮细胞的棉签将被充分挤压,挤压后,棉签上的细胞会释放出来液体。随后,实验人员将会用仪器检测,用以确定呼吸道上皮细胞是否采样成功。从实验人员穿隔离服到提取液体约需要10分钟。

  第三步

  提取病毒DNA

  在提取液体后,液体标本将被送到“核酸提取工作站”中。其实,这个“工作站”是一台仪器,专门提出病毒的核酸,也就是病毒的DNA。通过提取DNA,才会解开病毒的密码,甚至了解对付该病毒需要什么药品。

  记者了解到,这个环节以前都是手工提取,效率慢,提取的有效成分少,现在用“核酸提取工作站”进行提取,快速,准确。实验人员介绍,仪器提取采用磁珠法,也就是用磁珠吸附核酸,再把磁珠上的核酸洗出来,整个过程需要46分钟左右。

  第四步

  样本检测确定病毒

  2~4.5小时

  提取了病毒的核酸后,实验人员会向样本中添加反应剂,让病毒现形。针对H7N9病毒检测,国家下发的有9种反应剂,如果样本中存在H7N9病毒,就会起反应,再送到荧光定量机上检测,边检测可以边看结果,是不是流感,是哪类流感。从检测到出数据需要2~4.5小时。

  针对突发疫情,不知道什么原因的,省疾控还有秘密武器,一台荧光定量机相当于16台,同时进行16种检测。

 

(信息来源:中国日报网)

 

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